نحوه کالیبراسیون سمپلر یا میکروپیپت

کالیبراسیون سمپلر

کالیبراسیون ابزارهای حجم سنجی یا سمپلر ها از اولویت های هر آزمایشگاه می باشد چرا که اندازه گیری مقادیر برداشتی برای کیت های مصرفی برای شناسایی یون ها، مواد و پروتئین های بیولوژیک نیازمند ابزار حجم سنجی دقیق می باشد. ساخت و نصب سکوبندی ازمایشگاهی از این رو تمامی کارکنان آزمایشگاه باید روش انجام کالیبراسیون را دانسته و به صورت دوره ای در بخش فنی فعالیت خود انجام داده و مستندات مربوطه را ثبت و نگهداری نمایند.  ابزارهای حجم سنجی عبارتند از پیپت، سمپلر، بشر، ارلن، مزور و … که هر کدام نیازمند کالیبراسیون می باشند.

نحوه کالیبراسیون سمپلر یا میکروپیپت

ارزیابی به دو روش وزن سنجی و رنگ سنجی قابل انجام است، ولی در نبود ترازوهایی با رزولوشن مناسب برای کنترل سمپلر و کالیبراسیون منظم، استفاده از روش رنگ سنجی، توصیه می شود. رنگ سنجی به عنوان روشی مقرون به صرفه شناخته می شود که بیشتر آزمایشگاه های معتبر آن را به کار می برند. در این روش با استفاده از یک محلول رنگی با جذب پایدار، مثل رنگ سبز خوراکی در طول موج 620 یا 630 نانومتر یا پارانیتروفنل در طول موج های 401 یا 405 نانومتر، صحت عملکرد سمپلر و نیز قابلیت تکرار آن کنترل می شود. از آن جا که اغلب فتومترها بهترین عملکرد خود را در محدوده جذبی 0.4 نشان می دهند محلول های ذخیره رنگی با غلظتی تهیه می شوند که پس از مرحله رقیق شدن دارای جذبی در حدود 0.4 باشند.

کالیبراسیون سمپلر به دو روش صورت می گیرد

• روش رنگ سنجی  با استفاده  از رنگ سبز خوراکی و پارانیتروفنل
• روش حجم سنجی

کالیبراسیون سمپلر با رنگ سبز خوراکی

برای هر گروه باید یک محلول ذخیره از رنگ سبز خوراکی تهیه نمود. سمپلرها در کارهای متداول به دو گروه 10 تا 100 میکرولیتر و 100 تا 1000 میکرولیتر تقسیم می شوند. 155 میلی گرم درصد رنگ سبز در آب مقطر حل شده و برای گروه 100 تا 1000 میکرولیتر محلول 15.5 میلی گرم آماده می شود. غلظت در محلول های ذخیره به گونه ای انتخاب شده که محلول 155 میلی گرم درصد پس از رقیق شدن به نسبت 1.101 و محلول 15.5 میلی گرم درصد پس از رقیق شدن به نسبت 1.11 و جذبی حدود 0.4 داشته باشد .

سمپلرهای 100 تا 1000  میکرولیتر:

15.5 میلی گرم پودر رنگ سبز در 100 میلی لیتر آب مقطرحل شود.  (غلظت رنگ در محلول ذخیره این گروه ، 15.5 میلی گرم درصد است).

سمپلرهای 10 تا 100 میکرولیتر:

  155 میلی گرم پودر رنگ سبز در 100 میلی لیتر آب مقطر حل شود. (غلظت رنگ در محلول ذخیره این گروه 155 میلی گرم درصد است) .

سمپلرهای کمتر از 10 میکرولیتر:

1.55 میلی گرم پودر رنگ سبز در 100 میلی لیترآب مقطر حل شود. (غلظت رنگ در محلول ذخیره این گروه 1.55 میلی گرم درصد یا 1550 میلی گرم درصد است).

کالیبراسیون سمپلر با محلول پارانیتروفنل

به جای رنگ سبز خوراکی می توان از محلول پارانیتروفنل استفاده نمود. در این روش محلول ذخیره با توجه به حجم سمپلر تهیه می شود. سمپلرهای با حجم کمتر از 10 میکرولیتر برای تهیه محلول ذخیره 420 میلی گرم. پارانیتروفنل در 100 میلی لیتر آب مقطر حل می شود.

سمپلرهای  100 تا 1000 میکرولیتر:

42 میلی گرم پودر پارانیتروفنل، در یک لیتر آب مقطر حل می شود. (غلظت رنگ در محلول ذخیره این گروه،  42 میلی گرم در لیتر است)

سمپلرهای  10 تا 100 میکرولیتر:

42 میلی گرم پودر پارانینترفنل، در100میلی لیتر آب مقطر حل می شود. (غلظت رنگ در محلول ذخیره این گروه 42 میلی گرم درصد است).

سمپلرهای کمتر از 10 میکرولیتر:

420 میلی گرم پودر پارانتیروفنلنرمال تهیه شود. درحالی که برای رنگ سبز خوراکی باید از آب مقطر استفاده شود.

*نکته: در سال های گذشته رنگ سبز خوراکی گاهی به صورت ناهمگون و یا محلول عرضه شده که در این موارد، دستور کار بالا کاربرد نداشته و بهتر است از پارانیتروفنل استفاده شود.